QM100组织研磨仪在DNA提取中的应用

实验目的

对比五洲鼎创QM100高通量自动研磨仪与手工液氮法研磨后的新鲜组织样本在 DNA提取、RNA 提取性能方面的差异，评估自动研磨仪的适用性。

实验材料及试剂

1.  实验材料： 将 10 例 FT 样本分别用吸水纸吸干表面的水分后，称重后分装为2 管/例，20 mg±0.3 mg/管。

2.  实验试剂： 天根DP422 DNA/ RNA共提试剂盒

实验过程

1.  研磨

【自动研磨】向离心管内加入 300 μl 裂解液。将离心管放于液氮中，冷冻处理。

液氮冷冻处理后的离心管固定于自动研磨仪适配器中，向离心管中加入 2 粒 3

mm 磁珠。小心将适配器正确安装至自动研磨仪上。启动仪器，研磨组织。研磨后，再向离心管中加入 300 μl 裂解液（裂解液总使用量为 600 μl） 。

【手工研磨】 取样本放于研钵中，加入液氮后迅速研磨。将组织粉末转移至离心管中，称重后向其中加入 600 μl 裂解液。

2.  核酸提取、检测及保存

将上述分别使用两种研磨方法处理后的样本，使用 DNA RNA 共提试剂盒同

时提取 DNA 和 RNA。使用微量分光光度计测定 DNA、 RNA 的浓度及纯度。 DNA提取后于-20℃保存，RNA 于-80℃保存。

实验结果

实验结论

五洲鼎创QM100自动研磨仪处理与手工液氮研磨处理后提取 FT 的 DNA、RNA 在浓度、纯度上均无显著性差异（成对检验 P>0.05） 。但手工研磨有较大的样本损失率，对于DNA提取浓度较低的样品来说，自动研磨仪可以做到样品0损失，在DNA提取上有着明显的优势，且手工处理的过程复杂、易交叉污染，操作所用时间等方面均不及QM100自动研磨仪，因此QM100高通量组织研磨仪对于DNA提取工作相对于手工研磨处理有很大优势。